Retningslinjer for tining av celler
- Tin frosne celler raskt (< 1 minutt) i et 37°C vannbad.
- Fortynn de tinte cellene sakte før du inkuberer dem, med forvarmet vekstmedium.
- Plat opp tinte celler med høy tetthet for å optimalisere utvinningen.
- Bruk alltid riktig aseptisk teknikk og arbeid i en laminær hette.
Hvorfor er opptining av celler utført?
Det er viktig å tine cellene riktig for å opprettholde levedyktigheten til kulturen og gjøre det mulig for kulturen å komme seg raskere. Noen kryobeskyttelsesmidler, som DMSO, er giftige over 4 °C. Derfor er det viktig at kulturer tines raskt og fortynnes i kulturmedium for å minimere de toksiske effektene.
Hva er prosessen med å tine?
Tining er prosessen for å ta et frossent produkt fra frossen til en temperatur (vanligvis over 0°C) der det ikke er rester av is, dvs. "tining". Tining blir ofte sett på som en reversering av fryseprosessen.
Hva er den beste måten å fryse celler på?
Frys cellene sakte ved å redusere temperaturen med ca. 1°C per minutt ved å bruke en kryofryser med kontrollert hastighet eller en kryofrysebeholder som Mr. Frosty,” tilgjengelig fra Thermo Scientific Nalgene labware (Nalge Nunc). Bruk alltid det anbef alte frysemediet.
Hvordan tiner du en primærcelle?
Tørk utsiden av hetteglasset med celler med 70 % etanol eller isopropanol. I et biosikkerhetsskap, vri lokket en kvart omdreining for å avlaste internt trykk og stram deretter til igjen. Tin cellene raskt i et 37°C vannbad ved å snurre hetteglasset forsiktig. Fjern hetteglasset når det gjenstår en liten mengde is.
