Nitrocellulosemembraner er en populær matrise som brukes i proteinblotting på grunn av deres høye proteinbindingsaffinitet, kompatibilitet med en rekke deteksjonsmetoder (kjemiluminescens, kromogen og fluorescens), og evnen til å immobilisere proteiner, glykoproteiner eller nukleinsyrer.
Hvorfor bruker vi nitrocellulose?
Et nitrocelluloseglass, nitrocellulosemembran eller nitrocellulosepapir er en klebrig membran som brukes til å immobilisere nukleinsyrer i southern blots og northern blots Den brukes også til immobilisering av proteiner i western. blotter og atomkraftmikroskopi for dens uspesifikke affinitet for aminosyrer.
Hvorfor brukes PVDF i Western blotting?
Western blotting med polyvinylidendifluorid (PVDF)-membraner er en av de mest populære teknikkene for deteksjon og karakterisering av proteiner. Hvis denne teknikken kombineres med immundeteksjon, kan oppførselen til et bestemt protein avklares.
Er nitrocellulosemembran hydrofob?
I motsetning til polyakrylamid, gir nitrocellulose en passende støtte for etterfølgende proteinfarging eller immunkjemisk karakterisering. Binding til nitrocellulose er hovedsakelig mediert av hydrofob interaksjon (Schneider, 1980), selv om elektrostatiske krefter også kan være involvert (Farrah et al., 1981.
Hvilken er bedre nitrocellulose eller PVDF?
Mens nitrocellulose er sprø og skjør, er PVDF mer holdbar og har høyere kjemisk motstand, noe som gjør den ideell for reprobing og sekvensering. Nitrocellulose kan vise seg å være vanskelig å strippe og prøve på nytt uten å miste signal.