Hva er den beste måten å skille kloroplastene fra bufferen?

2024 Forfatter: Fiona Howard | [email protected]. Sist endret: 2024-01-10 06:41

For å kunne trekke ut pigmentene fra Kloroplastene er suspendert i en isolasjonsbuffer. For å kunne trekke ut pigmentene fra kloroplastene, må vi først kvitte oss med bufferen. Hva er den beste måten å skille kloroplastene fra bufferen? bruk en sentrifuge for å skille

Hvordan isolerer du en kloroplast?

I kloroplastisolasjonsmetoden brytes celleveggen mekanisk ved hjelp av en blender eller homogenisator. Deretter fjernes ubrutt bladvev og celleavfall ved filtrering. Kloroplastene samles opp ved sentrifugering ved bruk av en percoll-gradient.

Hvordan lager du en kloroplastisolasjonsbuffer?

Forbered den nødvendige mengden 1X kloroplastisolasjonsbuffer ved å fortynne 2X buffermassen 1:1 med dH2O-vann Tilsett 10 µL av 10 % BSA-løsningen per ml 1X kloroplast Isolasjonsbuffer. Rett før bruk, tilsett 1 µL DTT per 1 mL kloroplastisolasjonsbuffer. Merk denne bufferen som «Fullfør buffer».

Hva er i en kloroplastisolasjonsbuffer?

DNA-isolasjonsbuffer besto av 100 mM NaCl, 100 mM Tris-HCl (pH 8,0), 50 mM EDTA og 1 mM DTT Kloroplastlyset ble oppnådd ved å inkubere kloroplastpellet med 8 ml DNA-isolasjonsbuffer, 1,5 ml 20 % SDS, 20 µl 2-merkaptoetanol og 30 µl Proteinase K (10 mg/ml) i et sentrifugerør ved 55°C i 4 timer.

Hva er pH-verdien til bufferen som brukes til å homogenisere spinatblad i kloroplastisolasjonsprotokoll?

Spinat er lastet med gode kloroplaster og de isolerer seg lett. Du må legge bladene i en kald blender med 0,1 M fosfatbuffer, pH 7,5 og 0,5 M sukrose for å unngå at de sprekker.