Hvordan gjøre immunfluorescens?

Innholdsfortegnelse:

Hvordan gjøre immunfluorescens?
Hvordan gjøre immunfluorescens?

Video: Hvordan gjøre immunfluorescens?

Video: Hvordan gjøre immunfluorescens?
Video: Small Fiber Neuropathies- Kamal Chemali, MD 2024, November
Anonim

Det følgende er en oversikt over de forskjellige trinnene i en indirekte immunfluorescensfargingsprotokoll

  1. Eksperimentplanlegging og prøveforberedelse. …
  2. Sample Fiksering. …
  3. Cellepermeabilisering. …
  4. Blokkering. …
  5. Primær antistoffinkubasjon. …
  6. sekundær antistoffinkubasjon. …
  7. Motbeis og montering.

Hvordan utfører du immunfluorescens?

Alle inkubasjonstrinn finner sted ved romtemperatur

  1. Vask cellene to ganger og bruk en pinsett til å plassere dekkglasset med oppovervendte celler forsiktig inn i det fuktede kammeret.
  2. Fiks med 4 % formaldehyd i 10 minutter og vask 3 ×.
  3. Permeabiliser med 0,1 % TX-100/PBS i 15–20 minutter og vask 3 ×.

Hvordan bruker du immunfluorescens i en celle?

Immunofluorescensprotokoll for adherente celler

  1. Frø 1–1,5 x104 celler per brønn i et 4-kammer objektglass i 500 mL kulturmedium. Inkuber ved 37 °C ved 5 % CO2.
  2. 32–36 timer etter cellesåding, fjern cellekulturmediet og skyll cellene 3 ganger med 500 µL 1X PBS.

Hva er et eksempel på immunfluorescens?

For eksempel kan en forsker lage primære antistoffer i en geit som gjenkjenner flere antigener, og deretter bruke fargestoffkoblede sekundære kaninantistoffer som gjenkjenner geiteantistoffets konstante region (" kanin anti-geit" antistoffer).

Hva er bruken av immunfluorescensfarging?

Immunofluorescens (IF)-farging er en mye brukt teknikk i biologisk forskning og klinisk diagnostikk IF bruker fluorescensmerkede antistoffer for å oppdage spesifikke målantigener. Etterfulgt av bildebehandling er det en veldig direkte teknikk ettersom du faktisk kan se noe.

Anbefalt: