Man kan fryse og tine RIPA-buffer 2-3 ganger uten å miste styrken så lenge den er lagret på is under bruk (20-30 min). Oppbevar bufferen frossen ved -80 grader C.
Hvor lenge kan jeg beholde RIPA-buffer?
1. Hvis buffer skal brukes kontinuerlig, anbefales det at 10x-bufferen holdes ved 4°C i 1-2 uker. I lengre perioder bør buffer oppbevares ved -20°C. Alikvotering av 10x buffer anbefales hvis mange små eksperimenter skal utføres.
Kan RIPA-buffer lagres på?
Tilberedt RIPA-buffer bør alikvoteres og lagres ved −20°C. Legg protease- og/eller fosfatasehemmere til en tint alikvot før umiddelbar bruk. En milliliter buffer er tilstrekkelig til å lysere omtrent 5 millioner celler. …
Hvordan lagrer du RIPA-lysater?
Bruk klargjorte lysater så raskt som mulig, og oppbevar så kort tid som mulig. Oppbevar lysater ved -80℃ så lenge som mulig. For lysater som må oppbevares på lang sikt, overfør ferske tilberedte rør til en tilgjengelig -80 ℃ fryser for å forhindre nedbrytning.
Hvordan tiner du RIPA-buffer?
Etter fjerning av den endelige vaskeløsningen fra cellene, tilsett et passende volum RIPA-buffer (1 ml per 0,5 til 5 × 107 celler) til cellepelleten, og bland eller vortex kort for å resuspendere cellene fullstendig. Inkuber på is eller i kjøleskap (2–8 °C) i fem minutter.