Amfolytter brukes for å danne en pH-gradient i kapillæren, og proteinene som skal separeres migrerer (eller fokuseres) gjennom amfolyttmediet til de blir uladet ved deres pI verdier.
Hvorfor brukes amfolytter i IEF?
I IEF beveger amfolytter seg i henhold til ladningen deres under påvirkning av et elektrisk felt, i nærvær av en pH-gradient, inntil nettoladningen til molekylet er null (f.eks. isoelektrisk punkt, pI). … Selv de enkleste amfolyttene (f.eks. aminosyrer) kan skape en pH-gradient og fungere som en isoelektrisk buffer.
Hvorfor er isoelektrisk punkt viktig?
Det isoelektriske punktet er betydelig i proteinrensing fordi det representerer pH der løseligheten vanligvis er minimal. … Denne polymeren har unike egenskaper som sikrer at proteiner danner en pH-gradient når du påfører et elektrisk felt over løsningen.
Hvordan lager amfolytter pH-gradient?
I CIEF skapes en heterogen pH-gradient inne i kapillæren ved å påføre spenning over bæreramfolyttene Bredden av pH-gradienten avhenger av hvilken serie amfolytter som velges. Amfolytter er kommersielt tilgjengelige for å dekke både brede og smale pH-områder, som vist i figur 5.2.
Hva er amfolytter-kjemi?
Amfolytter er forbindelser som når de er oppløst i vann (som i seg selv er en amfotær forbindelse) kan virke enten som syre eller som en base.